DNTP oor Engels

DNTP

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nucleoside triphosphate

voorbeelde

a) Adicionar 5 μl de cDNA a 45 μl de mistura para PAR de modo a obter concentrações finais, em tampão não diluído, de 1,5mM de MgCl2, 0,2 mM de cada dNTP, 25 pmol de cada iniciador e 1U de polimerase de Taq.
(a) Five μl cDNA shall be added to 45 μl PCR mix to give final concentrations of 1x buffer, 1,5 mM MgCl2, 0,2 mM each dNTP, 25 pmol each primer and 1U Taq polymerase.

Essa pausa cinética fornece tempo para a dissociação do dNTP incorreto e para a ligação de outro dNTP à Pol I.
This kinetic pause gives time for the incorrect dNTP to dissociate and for Pol I to bind another dNTP.

Essa liberação é evitada pela adição de dNTPs não marcados.
This release is prevented by adding unlabeled dNTPs.

As células mantêm níveis equilibrados de dNTPs, por meio dos mecanismos discutidos na Seção 28.3Ad.
Cells maintain balanced levels of dNTPs through the mechanism discussed in Section 28-3Ad.

Em segundo lugar, as DNA polimerases fecham-se ao redor do dNTP que chega (Figura 28.7).
Second, DNA polymerases close down around the incoming dNTP (Figure 28.7).

Descrição da primeira vez em que a DNA-polimerase foi cristalizada com um molde e dNTP ligado.
Description of the first time that a DNA polymerase was crystallized with a primed template and bound dNTP.

Essa liberação é impedida pela adição de dNTPs não marcados.
This release is prevented by adding unlabeled dNTPs.

dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTT) Master Mix (#mM) diluído a #:# (para # mM) antes da utilização
dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTT) Master Mix (#mM) must be diluted # fold (at # mM) before use

— dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTT) Master Mix (20mM) diluído a 1:10 (para 2 mM) antes da utilização
— dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTT) Master Mix (20mM) must be diluted 10 fold (at 2 mM) before use

Tais estudos mostraram ainda que diferentes dNTPs poderiam se ligar ao mesmo sítio ativo.
The studies also showed that the different dNTPs bind the same active site.

Altos níveis de dATP produzem uma deficiência geral de outros dNTP nos linfócitos T.
High levels of dATP produce a general deficiency of other dNTPs in T lymphocytes.

O segmento anelado com o iniciador é então replicado seletivamente pela DNA-polimerase, usando o conjunto de dNTPs.
The primed segment is then replicated selectively by the DNA polymerase, using the pool of dNTPs.

A manutenção das proporções intracelulares adequadas de dNTPs é essencial para o crescimento normal.
Maintaining the proper intracellular ratios of dNTPs is essential for normal growth.

As misturas para PCR devem conter tampão (KCl 500 mM, Tris/HCl 100 mM [pH 9,0 a 25 °C] e Triton® X-100 1 %), MgCl2 2,5 mM, dNTP mix 0,2 mM, oligonucleótidos iniciadores direto e reverso 1 μM, Taq DNA polimerase 0,02 unidades μl–1 e 10 a 100 ng de ADN extraído.
PCR mixtures shall contain buffer (500 mM KCl, 100 mM Tris/HCl [pH 9,0 at 25 °C] and 1 % Triton® X-100), 2,5 mM MgCl2, 0,2 mM dNTP mix, 1 μM forward and reverse primers, 0,02 units μl– 1 Taq DNA polymerase, and 10 to100 ng of extracted DNA.

O segmento é, em seguida, replicado seletivamente pela DNA-polimerase, utilizando o conjunto de dNTPs.
The primed segment is then replicated selectively by the DNA polymerase, using the pool of dNTPs.

O grupo 3′-OH do último nucleotídio na fita fixa-se ao grupo 5′-fosfato do dNTP de chegada.
The 3¿ -OH group of the last nucleotide on the strand attacks the 5¿ phosphate group of the incoming dNTP.

O outro se liga ao dNTP de entrada e facilita sua saída do pirofosfato.
The other binds to the incoming dNTP and facilitates departure of the pyrophosphate.

Neste passo, a DNA polimerase sintetiza uma nova cadeia de DNA complementar à cadeia de matriz de DNA por adição de dNTPs livres a partir da mistura de reação que são complementares ao modelo na direção 5' a 3', condensando o grupo 5'-fosfato dos dNTPs com o grupo 3'-hidroxi no final da cadeia de DNA nascente (alongada).
In this step, the DNA polymerase synthesizes a new DNA strand complementary to the DNA template strand by adding free dNTPs from the reaction mixture that are complementary to the template in the 5'-to-3' direction, condensing the 5'-phosphate group of the dNTPs with the 3'-hydroxy group at the end of the nascent (elongating) DNA strand.

As misturas para PCR contêm tampão (KCl 500 mM, Tris/HCl 100 mM [pH 9,0 a 25 °C] e Triton® X-100 1 %), MgCl2 2,5 mM, dNTP mix 0,2 mM, oligonucleótidos iniciadores direto e reverso 1 μM, Taq DNA polimerase 0,02 unidades μl– 1 e ADN molde 0,2 ng μl– 1 num volume total de 50 μl.
PCR mixtures contain buffer (500 mM KCl, 100 mM Tris/HCl [pH 9,0 at 25 °C] and 1 % Triton® X-100), 2,5 mM MgCl2, 0,2 mM dNTP mix, 1 μM forward and reverse primers, 0,02 units μl– 1 Taq DNA polymerase, and 0,2 ng μl– 1 of the DNA template in a total volume of 50 μl.

Os níveis de cada um dos dNTPs modulam a atividade da enzima frente a outros NDPs.
Levels of each of the dNTPs modulate the activity of the enzyme toward the other NDPs.

O outro íon liga-se ao dNTP a ser adicionado e facilita a liberação do grupamento de saída pirofosfato.
The other binds the incoming dNTP and facilitates departure of the pyrophosphate leaving group.

O íon metálico inicialmente ligado ao dNTP estabiliza a carga negativa no produto pirofosfato.
The metal ion initially bound to dNTP stabilizes the negative charge on the pyrophosphate product.

b) Colocar em gelo os tubos com RA e adicionar os reagentes de transcrição reversa de forma a obter concentrações finais, em tampão não diluído, de 1mM de dNTPs, 100 ng de hexâmeros aleatórios, 20 U de inibidor de RNase e 200 U de MMLV-R, num volume total de 20 μl.
(b) Tubes containing RNA shall then be placed on ice and RT reagents added to give final concentrations of 1x buffer, 1mM dNTPs, 100 ng random hexamers, 20 U RNase inhibitor and 200 U MMLV-RT in a total volume of 20 μl.

Os ddNTPs são idênticos aos dNTPs, exceto que eles não têm um grupo 3′-OH.
The ddNTPs are identical with dNTPs, except that they lack a 3′-OH group.

Quando a enzima é incubada com DNA marcado com [32P] e sem dNTPs, você pode observar a liberação de [32P]dNMP.
When the enzyme is incubated with [32P]-labeled DNA and no dNTPs, you observe the release of [32P]dNMPs.