Kunkin reaktion kokonaisvolyymi on 20 μl ja lopulliset pitoisuudet 1 × Big Dye Terminator, 1 × sekvensointipuskuri, 10 pmol/μl etu- tai taka-aluketta ja 10 μl puhdistettua DNA:ta (laimennettu noin pitoisuuteen 10 ng/μl) ajetaan käyttämällä seuraavia ajo-olosuhteita DNA Engine Tetrad 2 Peltier -lämpöblokissa (tai vastaavassa): 94 °C:ssa 30 sekuntia, jonka jälkeen 96 °C:ssa 10 sekuntia, 50 °C:ssa 10 sekuntia ja 60 °C:ssa 4 minuuttia, kolme viimeistä vaihetta toistetaan 30 kertaa.
The total volume in each reaction is 20 μl, the final concentrations being 1 × Big Dye terminator, 1 × sequencing buffer, 10 pmol/μl forward or reverse primer and 10 μl of purified DNA (diluted to approximately 10 ng/μl) run using the following cycling conditions on a DNA Engine Tetrad 2 Peltier Thermal Cycler (or equivalent): 94 °C for 30 seconds followed by 96 °C for 10 seconds, 50 °C for 10 seconds and 60 °C for four minutes, cycling the last three steps 30 times.EurLex-2 EurLex-2